Противовоспалительный эффект фуллерена C60 в мышиной модели атопического дерматита
2026-08-29 21:54
Предыстория: Водорастворимая форма фуллерена C60 является перспективным инструментом для борьбы с воспалением, зависящим от ROS, включая аллергические заболевания. Противовоспалительные эффекты водной дисперсии C60 (nC60) оценивались на мышиных моделях атопического дерматита с использованием подкожных (SC) и эпикожных (EC) приложений в течение 50 дней. Высокостабильный nC60 был получен путем исчерпывающего диализа водного органического раствора C60 против воды, где размер и ζ-потенциал наночастиц фуллерена составят около 100 нм и -30 мВ соответственно.
Результаты: Чтобы вызвать воспаление кожи, самки мышей BALB/c были сенсибилизированы EC овальбумином три раза в течение одного недельного воздействия. Раствор nC60 вводили мышам подкожно (SC) (0,1 мг/кг) и эпикожно (EC) (1 мг/кг). В группах, пролеченных nC60, наблюдалось значительное подавление производства цитокинов IgE и Th2 и сопутствующий рост концентрации цитокинов Th1. Кроме того, при применении EC наблюдалось значительное увеличение уровней экспрессии Foxp3(+) и мРНК филаггрина. Гистологическое исследование образцов кожи показало, что терапевтический эффект был достигнут как при лечении EC, так и при лечении SC, но он был более эффективным с EC. Наблюдалось выдажее снижение эозинофилов и лейкоцитарной инфильтрации в обработанных образцах кожи.
Выводы: Мы предполагаем, что лечение nC60 меняет иммунный ответ с Th2 на Th1 и в некоторой степени восстанавливает функцию кожного барьера. Этот подход может быть хорошей альтернативой лечению аллергических и других воспалительных заболеваний.
Рис. 1 Протокол сенсибилизации и лечение nC60. Мышей сенсибилизировали OVA (100 µg) или физиологическим раствором, нанесенным 100 µл на стерильный пластырь. Пластырь нанося на 1 неделю, а затем удален. Лечение nC60 проводилось между приложениями (сенс): SC (0,1 мг nC60/кг) на 8, 15, 29, 36 дней; EC (1 мг nC60/кг) на 8, 10, 12, 15, 17, 19, 29, 31, 33, 36, 38, 40 дней. Контрольная группа («плацебо») не имела никакого лечения
Рис. 2 Изменения в концентрациях OVA-специфических антител в сыворотке крови, полученные после лечения nC60, обнаруженные методом ИФА. Результаты представлены в виде среднего значения (среднее значение ± SE, n = 8 для каждого). AD, мыши, сенсибилизированные к OVA (модель AD); nC60 EC, мыши, сенсибилизированные OVA, обработанные nC60 by EC; nC60 SC, мыши, сенсибилизированные OVA, обработанные nC60 от SC; плацебо, мыши, сенсибилизированные PBS.a OVA-специфический IgE ответ, b OVA-специфическое соотношение IgG1/IgG2a (*p < 0,05)
Рис. 3 Уровни цитокинов IL-4 (a), IL-5 (b) и IL-12 (c) в супернатантах спленоцитов мыши, стимулированных OVA, взятых после 3-й сенсибилизации и инкубированных с OVA в течение 72 часов (количественно о ELISA). Относительная экспрессия мРНК IFN-γ (d) в спленоцитах мыши, взятых после 3-й сенсибилизации и инкубированных с OVA в течение 72 часов (количественная опреденная ПЦР в реальном времени). Результаты представлены в виде средней концентрации (среднее значение ± SE, n = 8 для каждого). Обозначения колонок на диаграмме такие же, как и на рис. 2; *p < 0,05
Рис. 4 выражение Foxp3. Специфичная мРНК в спленоцитах мыши, стимулированных OVA (инкубированных с OVA в течение 72 часов) была количественно определена с помощью ПЦР в реальном времени. Результаты представлены в виде средней экспрессии мРНК (среднее значение ± SE, n = 8 для каждого). Относительные уровни экспрессии Foxp3 были рассчитаны с помощью HPRT (гипоксантин-гуанин-фосфорибозилтрансферазы) в каждом образце. AD: модель мыши AD; nC60 EC: мыши с OVA-сенсибилизи, обработанные nC60 EC; nC60 SC: мыши с OVA-сенсимлизией, обработанные nC60 SC; плацебо: PBS-сенсибилизированные мыши (*p < 0,05)
Рис. 5 выражение FLG. Специфичная мРНК в спленоцитах мыши, стимулированных OVA (инкубированных с OVA в течение 72 часов) была количественно определена с помощью ПЦР в реальном времени. Результаты представлены в виде средней экспрессии мРНК (среднее значение ± SE, n = 8 для каждого). Относительные уровни экспрессии FLG были рассчитаны с помощью HPRT (гипоксантин-гуанин-фосфорибозилтрансферазы) в каждом образце. AD: модель мыши AD; nC60 EC: мыши, сенсибилизированные к OVA, обработанные nC60 EC; nC60 SC: мыши с OVA-сенсибилизированными с помощью nC60 SC (*p < 0,05)
Рис. 6 Гистологические особенности (шкала 100 мкм). a Мыши, сенсибилизированные OVA и обработанные PBS («AD»); b мыши, сенсибилизированные OVA и обработанные nC60 EC («nC60 EC»); c мыши, сенсибилизированные OVA и обработанные nC60 SC («C60 SC»); d мыши, сенсибилизированные PBS («плацебо»); e оценка поражений кожи по сводному гистологическому индексу, приведенному в таблице 1